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微生物杀虫剂是利用微生物的活体制成的。在自然界,存在着许多对害虫有致病作用的微生物,利用这种致病性来防治害虫是一种有效的生物防治方法。从这些病原微生物中筛选出施用方便、药效稳定、对人畜和环境安全的菌种,进行工业规模的生产开发,从而制成微生物杀虫剂。
微生物杀虫剂主要可分为真菌、细菌和病毒三类。在其他微生物中,放线菌一般利用其代谢产物抗生素,而不直接利用其活体作杀虫剂。原生动物、线虫和立克次氏体等微生物的利用研究得很少,尚未实用化。
已发现的昆虫病原线种,寄生范围很广,但开发成杀虫剂的不多,已试验成功并有一定规模应用的有:利用白僵菌防治马铃薯甲虫、大豆食心虫、松毛虫和玉米螟;利用绿僵菌防治金龟子、孑孓;利用汤普森多毛菌防治柑橘锈螨;利用轮枝孢防治温室蚜虫;利用座壳孢防治粉虱和介壳虫等。
微生物杀虫剂中研究开发最成功的是利用芽孢杆菌作杀虫剂,主要品种为苏云金杆菌,已大范围的应用于农作物、森林、粮仓和蚊蝇等的防治。苏云金杆菌发现于20世纪初,30年代开始实用化,50年代即有工业生产,70年代以来发展较快,80年代全世界年销售额超过2000万美元。中国在70年代已大量生产,有青虫菌、杀螟杆菌等许多商品名称。苏云金杆菌有很多变种,其芽孢内含毒蛋白晶体,通称δ-内毒素,是杀虫的主要成分。当孢子进入害虫消化道后,毒素被活化,使害虫麻痹瘫痪而死。由于各变种所含蛋白晶体的结构不同,其毒力和适用的害虫对象也不同。例如应用较广的寇氏变种,用于防治鳞翅目幼虫;以色列变种用于防治孑孓。其他已开发利用的细菌杀虫剂还有日本甲虫芽孢杆菌,用于防治金龟子幼虫颇有效。
寄生于农业害虫的病毒已发现约 200种,有些已被开发作为病毒杀虫剂。其中大多数属于杆状病毒的核多角体病毒,少数是颗粒体病毒。昆虫病毒有高度的专一寄生性,通常一种病毒只侵染一种昆虫,而对他种昆虫和人无害,因此不干扰生态环境。但由于病毒只能用害虫活体培养增殖,使大规模工业生产受到限制。已经小规模商品化的病毒杀虫剂多数用于防治鳞翅目害虫,例如棉铃虫、舞毒蛾、斜纹夜蛾、天幕毛虫、菜粉蝶等。中国在80年代已广泛试验推广病毒杀虫剂。
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利用人工授精,可提高优良公牛的利用率,提高牛群的品质,降低生产所带来的成本,防止牛生殖道疾病传播,加之运输方便,配种技术不复杂,可显著提升母牛的受胎率。现就提高母牛受胎率谈几点见解。一、的质量的品质是决定母牛是否能受胎的基础。在冷冻制作的步骤中,除了按正常技术要领操作外,还应注意以下几点:
1.公牛的性准备:充分而有效的性准备,可促进副性腺液分泌,在采精前可充分冲洗公牛生殖道,以防止残留尿液对的污染;还能增强对公牛的性刺激,促进时生殖器官收缩,提高密度及量。通常公牛性准备时间应超过5~8分钟,空爬次数应在3次以上。2.采精频率:通常的冻精站为每周采精2~3次,每次采1回的采精频率。但据笔者10多年的工作实践,每周采精2~3次,每次间隔10分钟采2回的采精频率,与采1回相比,在主要指标上差异并不显著,但采精量却增加1倍,充分的发挥了公牛繁殖的潜能。3.排除影响品质的理化因素:主要的影响因素有:①温度,防止温度超过37℃,同时应防止冷休克及形成冰结晶;②pH值过高及过低;③渗透压过高、过低;④光照及辐射;⑤电解质浓度过高;⑥振动;⑦烟、有毒有害化学气体、重金属;⑧药品,甘油对复苏影响较大,应分2次或3次稀释,其他的消毒、防腐洗涤剂都会杀死,应避免接触。4.按标准化操作:冻精制作的步骤的规范化、标准化,解冻后各项指标应达到一定的要求。5.保存、运输应规范化。冻精的保存及运输应规范化管理,防止温度的回升,而导致复苏率降低。二、适时输精时间的判断牛的发情持续期短,特别是奶牛及杂交牛,肉牛发情症状不一定明显,很容易错过发情期而影响繁殖。母牛排卯时间约在发情结束后13~14小时,因此输精时间应在发情结束后进行。母牛适时输精的标准特征为:黏膜为粉红色,黏液呈透明玻棒状,子宫颈开张1~2指,卵泡发育至第三期,精神症状逐步消退,只接受爬跨而不再爬跨其他牛等。三、输精方法1.冻精解冻及检查:(1)颗粒冻精解冻。颗粒冻精解冻,不论采用干解冻还是湿解冻,解冻试管内壁温度都不应低于38℃,因此,解冻水温应在40℃左右,试管在温水中保持时间不应低于3分钟,然后才能解冻。每次解冻冻精只允许解冻1粒,冻精颗粒解冻2/3时应迅速从温水中取出解冻试管,摇动至全融化;干解冻后加入1毫升解冻液,温度应为36℃左右。上述解冻过程,温度掌握至关重要,如果温度过低,或解冻颗粒在2粒及以上,会导致温度回升速度减慢,缓慢经过-15~- 25℃的危险温区,而降低了复苏率。解冻后应保持温度相对来说比较稳定,以降低温度的影响。(2)细管解冻。正常解冻的方法是将细管投入35~40℃温水中,待细管颜色刚起变化就立即取出。但据董辉等报道,采用细管冻精在未解冻情况下,将冻精直接输入母牛子宫分叉处,让其在母牛子宫内启然解冻,或用揉搓法解冻,即从液氮中取出细管,在术者手中进行揉搓,等冻精融化后迅速输精。据报道,上述两种方法比正常解冻方法受胎率有了大幅度提高,同时该两种操作方法具有简便易行、不需热源、随处可用等优点。(3)冻精品质评定。现行输精前冻精品质评定指标主要有活率、密度及畸形率测定,然而由于操作规范不一,评估水平不同以及基层条件限制,导致了结果的差异。在3项指标中,活率是一项重要指标。然而温度高低,使活力差异较大。在活率测定时应注意下列事项才能保证结果的准确性:解冻后应保存在35~36℃水浴中;取中层检查;不能机械损伤;检查必须在37℃左右的恒温箱中进行;正确判定直线运动率;动作快,活率必须在 0.3以上的冻精才能用于输精,否则不能够确保正常受胎。2.输精方法:(1)输精器械及人员的清洗、消毒。输精器械是否彻底而有效的清洗、消毒,是能否传播生殖器官疾病、降低受胎率的重要的条件。一些基层站(点)未能对这一问题引起重视,因而使母牛生殖道疾病增多,情期受胎率下降。除了器械,操作人员的手臂也是生殖道疾病传播的主要途径。只有切断了传播途径,才能使母牛正常受胎。(2)母牛公牛效应的应用。人工授精开始后,发情母牛几乎不再与公牛接触,而动物行为学揭示,配前的性刺激不但公畜需要,母畜同样需要,适当的配前性刺激,可促进体内激素的分泌,促进受胎率的提高。因此,在输精前,在输精台前涂少量公牛、尿液,在输精前术者先轻揉母牛阴蒂或用关闭而又润滑的生殖器仿公牛动作等,都会引起母牛性兴奋,然后输精,可促进子宫收缩,减少倒流,促进运行,提高受胎率。(3)输精方法。要保证受胎率,通常只能采用直肠把握输精法,此法除把握子宫颈时应注意位置不能过前过后外,还应注意不可以过紧,否则会引起痛感而发生努责,除影响输精外,还会导致大量倒流。输精部位以输精管进入子宫颈三道皱褶为宜,里面不得超越分叉口,保证注入能均匀分到2个子宫体内,否则会降低受胎率。注精前应先稍退输精管.注射速度应缓慢、轻巧。注射完成后,先退出输精管,直肠内把握子宫颈的手臂应将子宫颈后方提高,并前低、后高地来回运动几下,促进全部进入子宫,防止倒流。
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